Implantación de electrodos en la corteza de un ratón para registros electrocorticográficos

Tomemos un ratón anestesiado con su cráneo expuesto en un marco estereotáctico. A este ratón se le ha inyectado un virus que expresa la proteína mutada de corte de actina en la corteza cerebral derecha.

Atornille un electrodo electrocorticográfico en el lugar de la inyección.

Marque y taladre el cráneo perpendicularmente para el electrodo posterior, el electrodo de referencia y los tornillos de mantenimiento.

Desinfecte los sitios con antisépticos y bloquéelos para evitar sangrado.

Inserte los tornillos y electrodos en los mismos ángulos de taladro y aplique cemento dental en el espacio entre ellos.

Ahora, usa luz para solidificar el cemento.

Cubra las bases de los electrodos y tornillos con cemento dental y vuelva a aplicar luz. Asegure el conjunto con cemento acrílico. Sutura la piel.

Conecte los cables dorados de los electrodos a las clavijas del conector.

Cubra el espacio del conector con cemento acrílico.

Deje que el mouse se recupere. Después de la recuperación, registre las señales de la corteza cerebral en respuesta a la inyección viral.

Para la implantación del electrodo, use fórceps Kelly rectos para atornillar lentamente un electrodo electrocorticográfico con un alambre de oro recto, en el eje vertical del orificio en el que se inyectó el AAV, dejando al menos 2,5 milímetros de tornillo fuera del cráneo para minimizar el daño a la duramadre y la corteza cerebral.

Use un bolígrafo para marcar la posición del electrodo de referencia 2,6 milímetros lateral a la derecha de la línea media y 0,7 milímetros posterior al bregma, y la posición del electrodo electrocorticográfico posterior a 1,5 milímetros lateral a la derecha de la línea media y 1,5 milímetros anterior a lambda, y las posiciones de tres tornillos de mantenimiento en el hemisferio izquierdo sin coordenadas específicas, pero lo más distantes posible entre sí y de los electrodos electrocorticográficos.

Use el taladro para perforar cuidadosamente el cráneo perpendicular a la superficie del cráneo en las posiciones marcadas de los otros electrodos y tornillos, y lave el cráneo perforado con una solución de povidona yodada al 10%.

Bloquee los agujeros con pequeños trozos enrollados de toallita delicada antes de instalar los tornillos para evitar el sangrado y la contaminación, y use pinzas Kelly rectas para insertar los tornillos en los orificios de perforación en el mismo ángulo en que se perforaron los agujeros. Coloque unas gotas pequeñas de cemento dental en el centro del espacio en forma de anillo dentro de los tornillos. Después de cubrir los ojos del animal, aplique luz durante tres a cinco minutos para solidificar el cemento y use cemento dental adicional para cubrir la base de los electrodos electrocorticográficos y los tornillos de anclaje para formar un contorno en forma de corona.

Después de aplicar de tres a cinco minutos más de luz, rellene el centro del montaje con cemento acrílico y retire las pinzas quirúrgicas.

Use una sutura de monofilamento absorbible sintético para cerrar la piel en la parte delantera y posterior del montaje para que el cráneo no quede expuesto, y use pinzas curvas para sostener el conector sobre el montaje para alinear cuidadosamente los cables dorados de los electrodos con los pines del conector. Luego, suelde rápidamente cada extremo del electrodo a un solo pin conector correspondiente.

Después de sacar el mouse del marco, cubra el espacio vacío entre el conector y la cabeza con el cemento acrílico y, después de pesarlo, coloque el mouse en una jaula limpia con una tapa sin malla en una almohadilla térmica.