Registro óptico de la actividad neuronal en cortes de cerebro teñidos con un tinte sensible al voltaje

Tome un corte de cerebro de ratón inmovilizado teñido con un tinte sensible al voltaje o VSD, moléculas fluorescentes que se integran en la membrana neuronal y responden a los cambios potenciales de la membrana.

Coloque la rebanada en una cámara de grabación.

Instale el electrodo de tierra para obtener una referencia de voltaje de referencia.

A continuación, coloque los electrodos de estimulación y registro en la rebanada.

Aplique un pulso eléctrico.

El pulso estimula las neuronas, desencadenando la apertura del canal de sodio dependiente de voltaje y la entrada de iones de sodio, lo que lleva a un cambio de potencial de membrana.

Esto induce un potencial de acción, medido por el electrodo de registro, y altera las propiedades fluorescentes del VSD.

Exponga el corte cerebral a una longitud de onda específica para excitar la CIV y desencadenar la emisión de fluorescencia.

Después de la estimulación, los canales de sodio se cierran mientras que los canales de potasio dependientes de voltaje se abren, promoviendo la salida de iones de potasio.

Esto cambia el potencial de membrana nuevamente y, en consecuencia, altera la fluorescencia de la CIV.

Registre la fluorescencia en tiempo real