Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 2:23 min. • July 8th, 2025
Toma el control y las larvas transgénicas de la mosca de la fruta Drosophila.
Las larvas transgénicas expresan un canal iónico sensible a la luz en las neuronas receptoras olfativas u ORN. Estas neuronas forman parte del circuito olfativo, que detecta estímulos olfativos y transmite señales al cerebro, guiando el movimiento larvario en respuesta a los estímulos.
Coloque las larvas en un plato con agarosa solidificada dentro de una arena de comportamiento y cubra el plato.
Exponga las larvas a una longitud de onda de luz que estimule los canales iónicos y registre el comportamiento de navegación de las larvas.
La luz activa el all-trans-retinal, un cromóforo, que induce la apertura de los canales iónicos, conocida como estimulación optogenética, y permite la entrada de cationes.
La afluencia genera potenciales de acción que transmiten señales a lo largo del circuito olfativo, impactando el comportamiento de navegación de las larvas.
Las larvas transgénicas con canales iónicos sensibles a la luz exhiben un cambio en la distancia recorrida en línea recta antes de cambiar de dirección, conocido como longitud de carrera, en comparación con las larvas de control.
Para el ensayo de comportamiento, mantenga una temperatura y humedad constantes en la sala de comportamiento. Prepare el medio rastrero larvario vertiendo 150 mililitros de agarosa derretida al 1,5% en una placa de Petri cuadrada de 22 centímetros por 22 centímetros.
Deje que la agarosa se solidifique y se enfríe durante 1 a 2 horas en las placas de Petri, antes de usarlas en el ensayo de comportamiento. Después de que la agarosa se haya solidificado, transfiera no más de 20 de las larvas de tercer estadio preparadas al centro de la placa de Petri y cubra la placa de Petri con su tapa.
Coloque la placa de Petri en la arena de comportamiento debajo de la cámara CCD. Encienda la fuente de luz LED infrarroja de 850 nanómetros para visualizar las larvas en el video. Inicie la cámara CCD para registrar el movimiento de las larvas. Finalmente, pase al procesamiento y análisis de datos.