Prueba de conexiones monosinápticas utilizando tetrodotoxina y canales de sodio resistentes a la tetrodotoxina

Comience con una configuración de electrofisiología que contenga una mosca transgénica inmovilizada con un cerebro expuesto.

Coloque una micropipeta de registro cerca de una neurona postsináptica conectada a una neurona presináptica que coexpresa canales de sodio resistentes a la tetrodotoxina y canales sensibles a la luz roja, y una interneurona con canales de sodio sensibles a la tetrodotoxina.

Aplique una succión suave a la micropipeta para formar un sello hermético con la membrana neuronal.

Luego, aplique una fuerte succión para romper la membrana.

Mantener un potencial celular constante. Introducir tetrodotoxina, que bloquea los canales de sodio en la interneurona, evitando la transmisión de señales desde la interneurona a la neurona postsináptica.

Sin embargo, los canales de sodio resistentes a la tetrodotoxina no se ven afectados, lo que permite que los iones de sodio ingresen a la neurona presináptica.

Ilumina la mosca con los pulsos de luz roja.

Esto estimula los canales sensibles a la luz, lo que permite que los cationes influyan y activen la neurona presináptica.

Esta neurona presináptica transmite directamente una señal a la neurona postsináptica sin involucrar a la int