Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 2:43 min. • July 8th, 2025
Comience con células endoteliales vasculares cerebrales o CVE en medios de cultivo.
Las células CVE son células de alta demanda de energía que recubren los vasos sanguíneos del cerebro y son esenciales para la fisiología cerebral.
Coloque las células en una placa de cultivo de células de flujo extracelular. Incubar para la fijación celular.
Reemplace los medios de cultivo con medios de ensayo de flujo extracelular que tengan el pH deseado.
Incubar sin dióxido de carbono para mantener el pH.
A continuación, tome un cartucho de sensor de flujo extracelular, que incluye sensores y una placa inferior.
Agregue una solución de calibración a la placa e incube sin dióxido de carbono para hidratar los sensores.
Estos sensores pueden medir los cambios en la concentración de oxígeno en el entorno extracelular, indicativos de actividad mitocondrial.
Luego, cargue el cartucho en una máquina bioanalizadora y calibre los sensores.
Reemplace la placa inferior con la placa que contiene las celdas.
Medir la función mitocondrial de las células CVE.
Después del número apropiado de subcultivos, siembre 1,6 x 104 células en 80 microlitros de medio completo por pocillo en una placa de cultivo celular de
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