Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 2:58 min. • July 8th, 2025
Asegure un ratón despierto en un marco estereotáctico, con un alambre plateado insertado en su duramadre y una abertura que exponga una región del cerebro que procesa los estímulos auditivos.
Llene una solución farmacológica en una pipeta de vidrio multibarril equipada con un electrodo de tungsteno y conéctela al soporte del marco estereotáctico.
Inserte cables de plata sin recubrimiento en los barriles, asegurándose de que un extremo entre en contacto con la solución mientras que el otro se conecta a un dispositivo que controla la liberación del medicamento.
Conecte los terminales positivo y de tierra de los cables de registro al electrodo de tungsteno y al cable de plata que entra en contacto con la duramadre, respectivamente.
Coloque el electrodo multibarril en la superficie del cerebro y aplique estímulos auditivos.
Registra la actividad neuronal.
A continuación, aplique una corriente positiva para liberar el medicamento.
El fármaco ingresa al cerebro y bloquea receptores específicos, evitando la unión de neurotransmisores inhibidores y aumentando la excitabilidad neuronal.
Finalmente, aplique los estímulos auditivos nuevamente e identifique el aumento de la respuesta neuronal después del tratamiento farmacológico.
En este procedimiento, coloque el cuerpo del animal en un inmovilizador acolchado con espuma hecho a medida. Asegure el poste de la cabeza a un soporte unido al marco estereotáxico. Este es un buen momento para darle al animal una recompensa líquida. A continuación, cubra el cuerpo del animal con una manta de algodón y fíjelo sin apretar con un hemicilindro de plástico y cinta adhesiva.
Use una jeringa con punta flexible para llenar los barriles con los medicamentos elegidos. Usando el micromanipulador, coloque el electrodo de barril múltiple en su soporte. Luego, coloque un alambre de plata sin recubrimiento dentro de cada barril para que un extremo entre en contacto con la solución y el otro extremo sea accesible. Luego conecte esos extremos al dispositivo de microiontoforesis.
Después de eso, conecte el terminal positivo al extremo del electrodo de tungsteno y el terminal de tierra al cable plateado que entra en contacto con la duramadre. Posteriormente, mueva el electrodo de barril múltiple hasta que la punta entre en contacto con la superficie del cerebro. Aplique solución salina estéril tibia para prevenir la desecación del tejido cerebral. En ese momento, aplique corriente de retención para evitar fugas de fármaco de la punta del barril mientras busca actividad de una sola unidad. Registrar la actividad neuronal y la aplicación iontoforética de gabazina.