Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 7:22 min. • July 8th, 2025
Tome segmentos de una arteria cerebral posterior de ratón.
Incubar con una solución enzimática para degradar la matriz del tejido, aflojando las células.
Reemplace la solución con un tampón, luego transfiera un segmento a una cámara de grabación.
Disociar mecánicamente las capas de tejido conectivo y células de músculo liso, aislando el tubo endotelial subyacente.
Asegure el tubo, retire las capas disociadas y agregue un tampón fisiológico.
Coloque la cámara dentro de un sistema de registro con flujo amortiguador continuo.
Introduzca un indicador de calcio fluorescente que ingrese a las células endoteliales, luego inserte un electrodo de registro en una célula.
Administre un fármaco que desencadene la afluencia de iones de calcio e induzca una señalización posterior para la liberación de calcio del retículo endoplásmico.
El indicador se une al calcio y, tras la excitación, emite fluorescencia.
El aumento de calcio activa los canales de potasio dependientes del calcio, lo que provoca la salida de potasio y altera el potencial de membrana.
Registre simultáneamente los cambios en el calcio intracelular a través de la señal fluorescente y el potencial de membrana utilizando el electrod
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