Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 2:17 min. • July 8th, 2025
Coloque un cubreobjetos que contenga un cocultivo en una cámara de registro perfundida con una solución extracelular oxigenada.
El cocultivo consiste en astrocitos, neuronas corticales de rata que expresan canales iónicos sensibles a la luz fusionados con una proteína fluorescente y neuronas derivadas de iPSC que expresan otra proteína fluorescente.
Usando un microscopio confocal, identifique una neurona derivada de iPSC fluorescente.
Avance una pipeta de registro llena de una solución intracelular hacia la neurona para establecer una configuración de toda la célula.
Mantenga un potencial de membrana negativo constante para mediciones de corriente precisas.
Iluminar el cocultivo con luz para activar los canales iónicos sensibles a la luz en las neuronas corticales, generando así un potencial de acción.
El potencial de acción provoca la liberación de neurotransmisores en la hendidura sináptica.
Si se conectan sinápticamente, los neurotransmisores se unen a los receptores de la neurona derivada de iPSC parcheada, abriendo canales iónicos y generando corrientes postsinápticas.
El aumento de las corrientes postsinápticas en las neuronas derivadas de iPSC después de la estimulación con
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