Imágenes de la señalización de calcio inducida por nicotina a lo largo de los axones del hipocampo ventral en cocultivos sinápticos
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 2:11 min. • July 8th, 2025
Tome cocultivos genéticamente modificados de cortes de hipocampo ventral de ratón y neuronas del núcleo accumbens en un cubreobjetos.
Las neuronas del hipocampo proyectan terminales axonales presinápticas que sobreexpresan los receptores nicotínicos de acetilcolina, formando sinapsis con las neuronas del núcleo accumbens postsináptico.
Las neuronas se cargan con un tinte indicador de calcio para mediciones de calcio intracelular.
Transfiera el cubreobjetos a una cámara de microscopio confocal perfundida con tampón que contenga iones de calcio.
Capture imágenes fluorescentes de las proyecciones axonales del hipocampo como control.
Perfunde nicotina, que se une a los receptores nicotínicos de acetilcolina en las neuronas del hipocampo, lo que desencadena la afluencia de calcio.
Los iones de calcio se unen al colorante intracelular, aumentando la fluorescencia.
Los axones del hipocampo liberan neurotransmisores excitadores, iniciando la transmisión sináptica en las neuronas del núcleo accumbens.
Lavar con tampón para eliminar la nicotina.
Con el tiempo, la activación del receptor nicotínico de acetilcolina provoca la liberación de calcio de las reservas intracelulares, lo que lleva a
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