Estimulación optogenética y registro electrofisiológico de eventos sinápticos en cortes de cerebro de rata

Comience con un corte de cerebro de rata que contenga la región de la neurona diana conectada con un axón sensible a la luz de una región cerebral diferente.

Coloque la rebanada en la cámara de grabación sumergida y asegúrela con un anclaje de rebanada.

Bajo un microscopio, localice la capa deseada e identifique la neurona piramidal objetivo.

Levante el objetivo del microscopio para crear un menisco con la superficie de la corte.

Baje una micropipeta de vidrio llena de solución de registro intracelular en este menisco.

Toque la célula piramidal identificada con la punta de la pipeta para crear una hendidura en la membrana.

Aplique succión para formar un sello.

Aumente la succión hasta que la membrana se rompa, estableciendo una configuración de célula completa.

Usando una fuente de luz montada, aplique pulsos de luz a la rebanada.

Estos pulsos de luz desencadenan un potencial de acción en el axón sensible a la luz, liberando neurotransmisores en la hendidura sináptica.

Registre las respuestas de la neurona piramidal a estas liberaciones para analizar la eficiencia sináptica.

Para la identificación de la célula diana, coloque el corte en la cámara de registro e inmovilícelo con un a