Análisis del reciclaje de vesículas sinápticas y la absorción de colorantes fluorescentes en larvas de Drosophila
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 2:42 min. • July 8th, 2025
Coloque una preparación neuromuscular de larvas vivas de Drosophila en una cámara de registro que contenga solución salina libre de calcio.
Las neuronas larvarias expresan un canal catiónico sensible a la luz.
Cambie a solución salina con calcio agregado que contenga un tinte fluorescente.
El colorante emite fluorescencia débilmente en el estado no internalizado, pero fuertemente cuando es internalizado por las neuronas.
Ilumina la larva con luz azul.
Esto activa el canal, induciendo la afluencia de cationes y la despolarización de las neuronas, iniciando un potencial de acción.
El potencial de acción alcanza la terminal sináptica en la unión neuromuscular, permitiendo la entrada de calcio y la exocitosis vesicular.
Posteriormente, la membrana unida al tinte se internaliza durante el reciclaje de vesículas.
Lavar con solución salina sin calcio para detener el reciclaje de vesículas y eliminar cualquier tinte no internalizado.
Visualice la señal de fluorescencia.
A continuación, introduzca solución salina sin colorantes y calcio añadido e ilumine nuevamente.
Esto induce otro potencial de acción, la entrada de calcio y la exocitosis de vesículas que contienen colorantes.
Visualiza la
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