Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 4:47 min. • July 8th, 2025
Comience con tubos que contengan giros cocleares de ratón pretratados con un agente permeabilizante y un agente bloqueador que eviten interacciones inespecíficas.
Cada giro detecta diferentes frecuencias de sonido y contiene células ciliadas que convierten el sonido en señales eléctricas. Estas señales se transmiten a través de neurotransmisores en sinapsis de cinta al nervio auditivo.
Retire la solución y agregue anticuerpos primarios que interactúan con las proteínas en el cabello y las células nerviosas en las sinapsis de la cinta, luego lave.
Incubar con anticuerpos secundarios marcados con fluoróforos rojos y verdes, que se unen a sus anticuerpos primarios.
Lavar para eliminar los anticuerpos secundarios no unidos.
Coloque la muestra en un portaobjetos de vidrio con un medio de montaje que contenga tinte nuclear para teñir los núcleos de azul.
Monte el cubreobjetos. Séquelo, luego use un microscopio confocal para obtener imágenes de cada segmento a varias profundidades.
Las sinapsis de cinta aparecen como puntos rojos y verdes colocados muy cerca.
Cuente estos puntos funcionales en cada turno para correlacionar su respuesta a la frecuencia del sonido.
Después de la disección,
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