Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 3:15 min. • July 8th, 2025
Tome una rata anestesiada y aplique un anestésico en su ojo para adormecer los reflejos.
Recorta los bigotes y desinfecta el área alrededor del ojo para evitar la contaminación.
Bajo un microscopio, sujete el párpado inferior para abultar el ojo, exponiendo la vena epiescleral.
Esta vena se conecta a la cámara anterior a través del canal de Schlemm y la malla trabecular para la salida del humor acuoso.
Inserte una microaguja con solución salina hipertónica en la vena expuesta.
Inyecte la solución salina, desplazando la sangre. Realice una segunda inyección opuesta a la primera para obtener un efecto uniforme en todo el ojo.
La solución salina ingresa a la malla trabecular.
La alta concentración de sal causa estrés osmótico, lo que provoca la muerte celular y la cicatrización de los tejidos. Esta cicatrización bloquea la salida del humor acuoso a través de la malla, aumentando la presión intraocular.
La presión elevada daña las células ganglionares de la retina, que son neuronas que transportan información visual al cerebro. El daño conduce al glaucoma, una afección que causa pérdida de visión.
En este procedimiento, después de anestesiar al animal con el cóctel KAX, verifique los reflejos pellizcando sus patas o cola para asegurarse de que el animal esté inconsciente. Luego, recorta los bigotes con unas tijeras. Posteriormente, sature un aplicador de punta de algodón con solución de betadine y frote el área alrededor del ojo experimental.
Bajo el microscopio, use un hemostático para sujetar el párpado inferior con el fin de abultar el ojo, exponer la vena epiescleral y restringir el movimiento del ojo. A continuación, perfore con cuidado la vena epiescleral con la microaguja en un ángulo de entre 10 y 20 grados con respecto a la vena. Una punción en la vena tiene éxito cuando se observa que la sangre ingresa a la punta de la microaguja.
Inyecte lentamente 50 microlitros de solución salina en la vena. Las venas se blanquearán a medida que la sal circule a través de la vasculatura, pero algunas regiones pueden mantener una apariencia roja como la sangre.
El paso más crítico en este procedimiento ocurre durante la inyección de la solución salina de dos molares. Es imperativo que se produzca un escaldado en la vasculatura para garantizar un resultado exitoso. Mantener una aguja estable en un ángulo de 20 grados es crucial para este procedimiento.
Después de eso, realice una segunda inyección en la vena para asegurar un daño completo de la capa de células ganglionares de la retina. En cuestión de minutos, se debe ver una apariencia turbia distintiva a través del iris del ojo a medida que la sal circula por el sistema vascular.