Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 2:55 min. • July 8th, 2025
Comience con un tubo que contenga perlas magnéticas pretratadas recubiertas con anticuerpos específicos para una proteína diana reticulada al ADN.
Agregue un lisado de neurona motora que contenga fragmentos de ADN e incube con agitación.
Los fragmentos de ADN interactúan con perlas recubiertas de anticuerpos, formando complejos de perlas y ADN.
Centrifugar para recoger el líquido del tapón y colocarlo en un separador magnético para precipitar los complejos de perlas-ADN.
Retire el sobrenadante que contiene fragmentos de ADN no unidos.
Introducir un tampón de lisis a base de detergente para solubilizar fragmentos de ADN unidos de forma no específica.
Centrifugar y realizar la separación magnética, luego retirar el sobrenadante.
Lavar con un tampón alto en sal para interrumpir las interacciones no específicas. Centrifugar, realizar la separación magnética y eliminar el sobrenadante.
Lavar con tampón LiCl para eliminar las interacciones no específicas restantes. Centrifugar, realizar la separación magnética y eliminar el sobrenadante.
Finalmente, lavar con tampón Tris-HCl, centrifugar y realizar la separación magnética.
Retire el sobrenadante y recoja las perlas que contienen los comp
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