Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 5:20 min. • July 8th, 2025
Coloque cerebros de Drosophila mutantes y de tipo salvaje en una solución que contenga un fijador y un detergente. Incubar con un balanceo suave.
El fijador preserva la morfología del tejido, mientras que el detergente permeabiliza las membranas celulares.
Deje que los sesos se asienten, luego retire la solución.
Lave los pañuelos con un tampón.
Agregue una solución de bloqueo para evitar la unión de anticuerpos no específicos.
Retire la solución y agregue anticuerpos primarios dirigidos a una proteína específica que regula el desarrollo axonal en las neuronas del cuerpo del hongo del cerebro, o MB.
Incubar para promover la unión de anticuerpos.
Lavar con tampón para eliminar los anticuerpos no unidos.
Incubar con anticuerpos secundarios conjugados con fluoróforos dirigidos a los anticuerpos primarios.
Lavar nuevamente para eliminar los anticuerpos no unidos, luego volver a suspender los cerebros en un medio de montaje.
Monte los cerebros en un portaobjetos de puente y visualícelos bajo un microscopio de fluorescencia.
En comparación con el tipo salvaje, los cerebros mutantes exhiben un fenotipo defectuoso, con proyecciones erróneas axonales y lóbulos MB faltantes.
Bajo el microsco
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