Determinación de la toxicidad inducida por nanopartículas en neuronas utilizando la microglía como biosensor sustituto
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 3:51 min. • July 8th, 2025
Tome cultivos microgliales en una placa de pocillos múltiples que contenga medios.
Reemplace la mitad de los medios en el pocillo de prueba con medios que contengan nanopartículas de plata y en el pozo de control con medios del vehículo. Incubar.
La microglía internaliza las nanopartículas, se activa y libera citoquinas proinflamatorias.
Transfiera los medios del vehículo y los medios acondicionados que contienen estas citocinas a filtros instalados en tubos de recolección.
Centrifugar para eliminar las nanopartículas, reteniendo las citoquinas.
Invierta los filtros en nuevos tubos de recolección, centrifugue y recoja el medio. Agregue medios nuevos.
A continuación, tome cultivos neuronales hipotalámicos.
Reemplace la mitad de los medios del pozo de control con medios del vehículo y los medios del pozo de prueba con medios acondicionados. Incubar.
Las citocinas se unen a los receptores de las neuronas hipotalámicas, activando vías de señalización que inducen la muerte neuronal.
Agregue resazurina e incube.
En las células vivas, las enzimas deshidrogenasas reducen la resazurina débilmente fluorescente a resorufina fluorescente.
Mida la fluorescencia.
La fluorescencia reducida indica
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