Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 4:04 min. • July 8th, 2025
Comience con Drosophila thoraces transgénicos y de tipo salvaje fijados químicamente en un amortiguador.
En los torácicos transgénicos, las uniones neuromusculares de los músculos longitudinales dorsales contienen neuronas que expresan una proteína mutante que induce la neurodegeneración.
Retire el tampón y congele rápidamente los tóralos para evitar daños tisulares durante la bisección.
Agregue un tampón nuevo y transfiera los tóracos a los platos de disección.
Coloque un tórax ventral hacia arriba y retire los grupos de células nerviosas para exponer la línea media.
Divida a lo largo de la línea media para obtener hemitórax.
Retire el exceso de tejido.
Incube los hemitócados en un tampón de bloqueo para permeabilizar las membranas y evitar la unión de anticuerpos no específicos.
Agregue anticuerpos conjugados con fluoróforos dirigidos a una glicoproteína expresada en neuronas NMJ y filamentos de actina muscular.
Eliminar los anticuerpos no unidos.
Coloque los hemitórcados en un portaobjetos de puente, agregue medios de montaje y monte los pañuelos.
Visualice bajo un microscopio.
En comparación con el tipo salvaje, los mutantes muestran una tinción neuronal reducida, lo que indica
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