Diferenciación y Maduración de Células Madre Embrionarias Humanas en Organoides Neurales

Comience con células madre embrionarias humanas en un medio de cultivo.

Incubar para la proliferación celular y la formación de esferas.

Transfiera estas esferas a un nuevo pozo con un medio que contenga factores de diferenciación.

Incubar agitando suavemente. Los factores de diferenciación impulsan las células madre hacia el linaje neural.

Reemplace regularmente la mitad del medio.

Reemplace el medio con un medio de inducción neural, luego incube para obtener progenitores neurales.

Cambie a un medio rico en factores de crecimiento e incube para promover la proliferación celular y la formación de rosetas neurales.

Luego, cultive en un medio que contenga inhibidores para bloquear la diferenciación celular no deseada.

Reemplace este medio con un medio que contenga factores de crecimiento e inhibidores. Incubar para inducir la diferenciación en células gliales y neuronas primarias.

Más tarde, coloque las rosetas neurales en una membrana hidrofóbica en un pocillo portador de insertos que contenga un medio de maduración rico en inhibidores.

Incubar sin agitar para permitir la maduración de las células neuronales y gliales en una interfaz aire-líquido, formando organoides neuronales.

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