Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 2:24 min. • July 8th, 2025
Comience con una rata anestesiada y haga una incisión por encima de la órbita del ojo.
Diseccionar el tejido subcutáneo para acceder a la cavidad orbitaria, que contiene el nervio óptico.
Bajo un microscopio, disecciona la conjuntiva, seguida del tejido conectivo subyacente.
Luego, retraiga los músculos circundantes y la glándula. Corta las capas protectoras para exponer el nervio óptico.
El nervio óptico consta de fibras nerviosas mielinizadas ricas en lípidos que transmiten señales eléctricas.
A continuación, tome una micropipeta de vidrio preensamblada llena de lisolecitina, un agente disruptor de lípidos y un tinte para el seguimiento visual.
Inserte la micropipeta en el nervio óptico expuesto e inyecte la lisolecitina.
Sutura la incisión de la piel y aplica ungüento antibiótico para prevenir infecciones, luego deja que la rata se recupere.
En el nervio óptico, la lisolecitina inyectada interrumpe la integridad de la vaina de mielina que rodea las fibras nerviosas.
Esto da como resultado una desmielinización localizada, lo que reduce la transmisión de señales a través del nervio óptico.
Prepare al animal para la cirugía como se describió anteriormente y haga una incisión en la piel de 1 a 1,5 centímetros por encima de la órbita de cualquiera de los ojos. Con unas tijeras finas de iris, abra el tejido subcutáneo y acceda a la cavidad orbitaria. Luego, bajo un estereoscopio, abra la conjuntiva y la cápsula de Tenon anterior.
A continuación, retraiga los músculos extraoculares y las glándulas lagrimales intraorbitarias para exponer unos 3 milímetros del nervio óptico. Alrededor del nervio óptico, use una cuchilla oftálmica para abrir las capas de duramadre y aracnoides longitudinalmente, luego inserte una micropipeta de vidrio unida a una jeringa Hamilton en el nervio 2 milímetros posterior al globo.
Durante 30 segundos, inyecte un bolo de lisolecitina con tinte. Para completar el procedimiento, sutura la incisión de la piel, aplica ungüento antibiótico para prevenir infecciones, mueve al animal a una almohadilla térmica y vigílalo hasta que se recupere.