Generación de un modelo de ratón con lesión cerebral traumática utilizando una sonda impactadora

Comience con un ratón inmovilizado y anestesiado con la cabeza afeitada.

Aplicar una pomada para los ojos y desinfectar el cuero cabelludo con yodo.

Retire el exceso de yodo y cubra el ratón con un paño quirúrgico.

Haga una incisión en la línea media para exponer el cráneo y limpiar la herida.

Marque un círculo en un lado del cráneo, apuntando a la corteza cerebral.

La corteza contiene neuronas motoras y sensoriales cruciales para la transmisión de señales entre el cerebro y el cuerpo.

Perfora el hueso del cráneo sobre la marca de forma circular, luego retira el colgajo óseo para exponer la corteza.

Coloque una sonda de impacto esterilizada sobre el área expuesta. Golpee la sonda sobre el tejido para administrar alta presión.

Esta presión induce un trauma en la corteza cerebral, interrumpiendo las neuronas motoras y sensoriales y perjudicando la transmisión de señales.

Limpiar la herida y suturarla. El modelo de ratón con lesión cerebral traumática está listo para más experimentos.

Para realizar una craniectomía unilateral, confirme la falta de respuesta al pellizco del dedo del pie en el ratón anestesiado y asegure el ratón en un marco estereotáxico. Aplique ungüento oftálmico antibiótico en los ojos con un hisopo de algodón estéril y una solución a base de yodo en el área del cuero cabelludo afeitado. Retire el yodo con etanol al 70% y cubra al animal con un paño quirúrgico fenestrado.

Haga una incisión de 1.5 a 2 centímetros en la línea media del cuero cabelludo y use hisopos de algodón estériles para limpiar la herida y despejar la fascia izquierda de la línea media en el bregma. Use una sonda impactadora para identificar el sitio de la craniectomía y establezca el punto de referencia estereotáxico x igual a 0, y igual a 0 en bregma. Ajuste la sonda lateralmente a dos milímetros a la izquierda de la línea media. Use un marcador de punta fina seguro para cirugía para marcar un círculo de cinco milímetros de diámetro alrededor del área de presunto impacto.

Levante y gire el impactador fuera de su posición y complete el círculo de 5 milímetros. Vuelva a colocar brevemente el impactador en su posición para verificar la precisión del círculo de 5 milímetros. Luego, levante y gire el impactador fuera de su posición, y use una herramienta manual de kit de micromotor rotativo de alta velocidad equipada con una broca de punta redonda de 0.6 o 0.8 milímetros para hacer un agujero abierto en el cráneo a una velocidad máxima del 70% al 80%. Aplique una ligera presión en el cráneo mientras perfora a lo largo del contorno circunferencial de 5 milímetros para adelgazar este borde y use fórceps para levantar el colgajo óseo resultante.

La perforación a través de las líneas de sutura puede presentar dificultades adicionales ya que el hueso se interrumpe y requiere presión adicional. Los vasos sanguíneos pueden estar en estrecha asociación y, por lo tanto, es probable que se produzcan eventos hemorrágicos.

Para inducir una lesión leve por impacto cortical controlado, limpie la sonda del impactador con una almohadilla de preparación con alcohol estéril y vuelva a colocar la sonda del impactador en su posición sobre la corteza expuesta. Baje la sonda hasta que toque la superficie de la duramadre y marque esta posición como z igual a 0. Retire el pistón y muévase a z igual a menos 1 milímetro, y descargue el pistón para impactar la corteza. Levante inmediatamente el pistón y mueva el brazo fuera de su posición, e irrige la corteza con un generoso volumen de solución salina, y use puntos de sutura interrumpidos simples y sutura de seda 5-0 para cerrar la incisión del cuero cabelludo.