Detección de microhemorragias cerebrales en un modelo de rata

Las microhemorragias cerebrales, o CMH, son hemorragias cerebrales neuroinflamatorias causadas por la interrupción de la barrera hematoencefálica, lo que resulta en la fuga de glóbulos rojos, o RBC, al tejido cerebral.

Para detectar CMH, comience con tejido cerebral fijo de una rata con CMH.

Sumerja el tejido en sacarosa para crioprotección.

Usando un crio-micrótomo, seccione el tejido y recoja una sección en un portaobjetos de vidrio.

Lave para eliminar el fijador residual.

Aplicar colorante de hematoxilina unido a un catión metálico que interactúa con el ADN cargado negativamente, tiñendo el núcleo de color púrpura rojizo.

Siga con alcohol ácido para eliminar el exceso de tinte, luego aplique un agente azulante alcalino para neutralizar el ambiente ácido y convertir el tinte a su forma azul, mejorando el contraste.

Lave el tejido con alcohol para mejorar la penetración de la mancha, luego aplique eosina para teñir los glóbulos rojos de color naranja y los componentes del tejido de rosa.

Deshidrate el tejido utilizando concentraciones crecientes de alcohol y límpielo con xileno para visualización microscópica.

Capture imágenes para detectar los glóbulos rojos filtrados de color ro