JoVE Encyclopedia of Experiments
Neurociencia
0 vistas • 2:26 min • July 8th, 2025
Comience con una solución de resiniferatoxina (RTX), un agonista de alta afinidad del receptor TRPV1: canales iónicos sensibles al dolor expresados en las neuronas sensoriales.
Tome un ratón adulto anestesiado y administre RTX por vía intraperitoneal.
El fármaco entra en circulación sistémica y llega a los ganglios de la raíz dorsal (DRG), un grupo de cuerpos celulares de neuronas sensoriales ubicados cerca de la médula espinal.
RTX cruza la barrera hematonerviosa e interactúa con neuronas sensoriales de pequeño diámetro en el DRG que expresan abundantemente TRPV1.
La unión de RTX a TRPV1 activa los receptores, induciendo una afluencia masiva de iones de calcio en las neuronas.
El calcio intracelular activa las enzimas que degradan los fosfolípidos de la membrana celular, las proteínas celulares y el ADN, lo que finalmente conduce a la muerte neuronal.
Posteriormente, las fibras nerviosas intraepidérmicas (IENF), las terminales periféricas de las neuronas sensoriales de pequeño diámetro que inervan la piel, comienzan a degenerarse.
Esta degeneración de IENF da como resultado la pérdida de información sensorial de la piel, estableciendo así un modelo de neuropatía de fibra pequeña.
Para comenzar, póngase el equipo de protección personal y tome las precauciones adecuadas al preparar la solución madre de resiniferatoxina o RTX. Diluya una alícuota de 600 microlitros en solución salina para el experimento y divida el resto en alícuotas de 12 microlitros para su almacenamiento. Para ratones de prueba, use ratones ICR machos adultos de ocho semanas de edad, que pesen entre 35 y 40 gramos. Administrar una dosis única de solución RTX por vía intraperitoneal con una jeringa de microinyección. A continuación, inyecte un segundo grupo de ratones con un volumen igual de vehículo para que sirva como control. Después de hacer todas las inyecciones, aloje a los ratones en sus jaulas caseras y asegúrese de que tengan acceso improvisado a comida y agua.