Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 2:00 min. • July 8th, 2025
Tome un ratón anestesiado con microheridas en la almohadilla del pie que exponen el estrato basal, la capa más profunda de la epidermis.
Esta capa contiene fibras nerviosas periféricas conectadas a los ganglios de la raíz dorsal, o DRG, cerca de la médula espinal.
Aplique un inóculo del virus de la pseudorrabia, que se dirige al sistema nervioso, a la herida y frótelo con el eje de una aguja para mejorar la adsorción.
El virus se une a los receptores de la superficie celular, lo que permite que el virus ingrese y comience la replicación.
Las partículas virales se propagan a las células cercanas y entran en los nervios periféricos.
Luego, el virus viaja al DRG y se propaga a través de la médula espinal hasta el cerebro, infectando las neuronas.
Las neuronas infectadas liberan DAMP, activando la microglía residente, que secreta citoquinas y quimiocinas para atraer macrófagos y neutrófilos.
Estas células inmunitarias liberan especies reactivas de oxígeno y enzimas proteolíticas que dañan las neuronas, lo que provoca neuroinflamación.
Aplique tópicamente 20 microlitros del título apropiado de inóculo de virus en la almohadilla del pie desgastada. Realice simulacros de inoculación con medio solo en las almohadillas desgastadas de los animales de control en paralelo. Después de cada aplicación, frote suavemente la almohadilla del pie 10 veces con el eje de una aguja para facilitar la absorción del virus cada 10 minutos durante 30 minutos. Cuando la almohadilla de las patas desgastada esté seca, deje que los ratones se recuperen con monitoreo hasta la decúbito esternal, antes de colocar a los animales en jaulas individuales para el seguimiento clínico y el muestreo.