JoVE Encyclopedia of Experiments
Neurociencia
0 vistas • 1:56 min • July 8th, 2025
Comience con una jeringa que contenga células T-helper o Th17 capaces de reconocer una proteína acuaporina-4 de los astrocitos en el SNC, incluida la médula espinal, que desempeña un papel en la transmisión de señales al cerebro.
Inyecte estas células Th17 en la vena de la cola de un ratón restringido. Las células ingresan al torrente sanguíneo y circulan por todo el cuerpo.
Simultáneamente, administrar por vía intraperitoneal una toxina bacteriana derivada de la Bordetella pertussis.
La toxina altera la barrera endotelial de los vasos sanguíneos y permite que las células Th17 se infiltren en la médula espinal.
Las células Th17 infiltradas interactúan con los astrocitos que expresan la acuaporina-4 y se activan.
Estas células activadas liberan citoquinas proinflamatorias, lo que provoca la infiltración de células inmunitarias mononucleares, incluidos los macrófagos.
Los macrófagos liberan moléculas inflamatorias que dañan la vaina de mielina de las fibras nerviosas circundantes.
Esta desmielinización interrumpe la transmisión de señales nerviosas, lo que provoca rigidez de la cola y un movimiento restringido de las extremidades traseras, lo que indica la aparición de parálisis.
Dentro de una hora de su recolección, transfiera las células a una jeringa de 1 mililitro y administre 200 microlitros de células a cada animal receptor por vía intravenosa a través de la vena de la cola. Luego, inyecte a cada ratón por vía intraperitoneal de inmediato, y dos días después, con 200 nanogramos de toxina B. pertussis diluida en 200 microlitros de PBS.