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Tome un ratón anestesiado y aplique ungüento para los ojos para evitar que sus ojos se sequen.
Afeitar la cabeza, desinfectar el cuero cabelludo e incidir en el plano sagital para exponer el cráneo.
Retire la capa de tejido conectivo y marque el área objetivo para la lesión.
Perfore para crear un colgajo óseo, luego retírelo para exponer la duramadre, la cubierta externa del cerebro.
Coloque una cánula sobre la duramadre y asegúrela con cemento dental.
Llene la cánula con solución salina, asegurándose de que no se formen burbujas de aire, y conéctela al tubo del dispositivo de percusión de fluido lateral, que contiene un péndulo y un depósito lleno de líquido.
Libere el péndulo desde un ángulo calibrado para golpear el depósito, generando un pulso de presión que viaja a través del líquido y llega al cerebro.
El estrés mecánico daña las neuronas, causando una lesión cerebral traumática.
Retire la cánula, sutura la incisión y deje que el ratón se recupere para un análisis más detallado.
Para la inducción de lesiones cerebrales traumáticas, confirme la falta de respuesta al pellizco del dedo del pie en un ratón anestesiado y aplique ungüento en los ojos del animal. Después del afeitado, desinfecte la piel expuesta del cuero cabelludo con etanol al 70% antes de incidir el cuero cabelludo en un plano sagital. Con fórceps, retraiga la incisión en ambos lados y separe ligeramente el periostio.
Usa un marcador para dibujar un círculo de 3 milímetros de diámetro en el área parietal derecha del cráneo, a 2 milímetros de distancia de la línea media. Use un taladro eléctrico para penetrar con cuidado el cráneo sin dañar la duramadre. Retire el colgajo óseo para exponer una ventana ósea de 3 milímetros y coloque una cánula de plástico para lesiones sobre la craneotomía.
Después de cementar la cánula al cráneo con acrílico dental, use una jeringa de 5 mililitros para llenar la cánula con solución salina normal estéril al 0,9%, teniendo cuidado de evitar burbujas. Encienda el osciloscopio y el amplificador. Confirme que el tubo de alta presión del dispositivo de entrada de percusión de fluido lateral esté libre de burbujas de aire y entregue aproximadamente 10 pulsos de prueba hasta que el dispositivo emita una señal constante.
Ajuste el ángulo de la posición inicial del péndulo para alcanzar una intensidad de pulso de aproximadamente dos atmósferas estándar y conecte la cánula de entrada al dispositivo de lesión por percusión de fluido lateral. Apriete el gatillo para liberar el péndulo, induciendo la lesión cerebral. Luego obtenga y transmita un pulso a la duramadre a través de todo el sistema de tubos cerrados llenos de fluido.
Después de la inducción de una lesión cerebral, retire la cánula y sutura la incisión. Luego, coloque al ratón en una almohadilla térmica con monitoreo hasta que sea ambulatorio, antes de devolver al animal a su jaula de casa con acceso ad libitum a comida y agua.