Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 2:31 min. • July 8th, 2025
En el cerebro del pez cebra, las neuronas expresan receptores de orexina y cannabinoides que regulan el metabolismo.
En el pez cebra obeso inducido por la dieta, o DIO, estos receptores se colocalizan cada vez más para formar heterómeros, alterando la señalización posterior e impactando la regulación metabólica.
Tome criosecciones del tejido cerebral tanto del pez cebra control como del pez cebra DIO. Lave las secciones con tampón para eliminar el medio de inclusión.
Tratar con un tampón bloqueador de permeabilización para permeabilizar las membranas celulares y enmascarar sitios de unión no específicos. Lave para eliminar el exceso de tampón.
Incubar con un cóctel de anticuerpos primarios dirigido a los receptores. Lavar para eliminar los anticuerpos no unidos.
Incubar con diferentes anticuerpos secundarios marcados con fluoróforos que se unen a los anticuerpos primarios. Lavar para eliminar los anticuerpos no unidos.
Agregue un tinte fluorescente de unión al ADN para etiquetar el núcleo. Luego, aplique un medio de montaje y selle las secciones con un cubreobjetos.
Usando un microscopio confocal, detecte la fluorescencia del anticuerpo. El aumento de la colocalización de los antic
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