Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 1:58 min. • July 8th, 2025
Comience con una placa de pocillos múltiples que contenga una barrera hematoencefálica in vitro o un modelo BBB.
Este modelo consiste en células endoteliales adheridas al lado superior o sanguíneo y astrocitos en el lado inferior o cerebral de un inserto de membrana recubierto de matriz.
Agregue isotiocianato de fluoresceína o FITC, un tinte fluorescente, a la cámara superior de un pocillo de control.
Por el contrario, agregue ferritina cargada con FITC, o FITC-ferritina, a la cámara superior de un pocillo de muestra y luego incube.
En el pozo de control, el FITC libre permanece confinado a la cámara superior, con un cruce mínimo a través de la BBB.
Mientras tanto, en el pocillo de la muestra, los complejos FITC-ferritina se unen a los receptores de las células endoteliales.
Esto permite la internalización mediada por receptores y el transporte a la cámara inferior.
A continuación, recolecte regularmente el medio de las cámaras inferiores de ambos pocillos y mida la intensidad de la fluorescencia.
El control exhibe una fluorescencia más baja, mientras que la muestra muestra una fluorescencia más alta, lo que confirma la permeabilidad diferencial de la BBB para FITC y FITC-ferritina
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