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Neurociencia
0 vistas • 3:43 min • July 8th, 2025
Tome una jeringa llena de levodopa, un precursor de la dopamina y un inhibidor de la conversión de dopamina.
Inyecte esta solución en el tejido subcutáneo de una rata restringida con enfermedad de Parkinson, que exhibe neuronas productoras de dopamina dañadas.
En la rata, el inhibidor se une a las enzimas productoras de dopamina y previene la conversión prematura de levodopa en dopamina.
La levodopa ingresa al torrente sanguíneo, cruza la barrera hematoencefálica a través de canales de aminoácidos y entra en las neuronas productoras de dopamina no dañadas.
Las enzimas en estas neuronas convierten la levodopa en dopamina, un neurotransmisor excitador, y la liberan en la sinapsis.
La dopamina se une a sus receptores en las neuronas postsinápticas, desencadenando la transmisión de señales.
Repita las inyecciones periódicamente para aumentar la producción de dopamina.
Con el tiempo, el exceso de dopamina conduce a una sobreestimulación de sus receptores y una señalización neuronal excesiva, lo que eventualmente interrumpe los movimientos corporales de la rata.
Coloque a la rata en una jaula y observe su comportamiento. La rata exhibe movimientos corporales involuntarios y repetitivos, conocidos como discinesias, inducidos por levodopa.
Antes de la inyección de L-DOPA, agregue el volumen adecuado de solución salina estéril a la mezcla de L-DOPA y benserazida liofilizada previamente pesada en el vial ámbar, y agite bien durante 10 segundos. Inmediatamente después de la preparación, llene el volumen requerido de la mezcla de L-DOPA-benserazida para cada animal en jeringas individuales, montadas con una aguja de calibre 26, y etiquete cada jeringa con una identificación individual del animal.
Después de llevar la primera jaula al banco de inyección, retire la rata de su jaula para colocarla en la superficie de inyección. Use la mano no dominante para sujetar la cabeza y los hombros de la rata con la palma contra la superficie, y raspe la piel de la espalda que recubre las escápulas con el pulgar y el índice. Use la mano dominante para inyectar el volumen de L-DOPA en el espacio subcutáneo entre los dedos, manteniendo la aguja paralela al cuerpo para evitar la inyección intramuscular.
Después de la inyección, mueva la rata a la jaula. A continuación, configure el temporizador en uno o dos minutos y repita el procedimiento, inyectando una rata cada uno o dos minutos hasta que se inyecten todas las ratas. El día de calificación, coloque un temporizador al lado de la jaula para observar la discinesia inducida por levodopa o la intensidad del comportamiento de LID, mientras estima la frecuencia de cualquier comportamiento dado durante el período de calificación.
Califique la intensidad y la frecuencia de los movimientos de discinesia distónica e hipercinética, incluido el inicio inicial del comportamiento de LID, el comportamiento máximo y la fase de declive en el número deseado de puntos de tiempo. Si usa intervalos de calificación de un minuto, configure un temporizador de un minuto para calificar a la primera rata y continúe la calificación a través de todas las ratas a intervalos de un minuto.