Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 2:04 min. • July 8th, 2025
Comience con una diapositiva que contenga una sección delgada de un organoide cortical que contiene células gliales y neuronas en varias etapas del envejecimiento.
Las neuronas envejecidas, en un estado de senescencia con función celular en declive, contienen altos niveles de beta-galactosidasa.
La sección se trata previamente con un fijador para estabilizar la estructura celular y un agente permeabilizante para permeabilizar sus membranas.
Coloque el portaobjetos en un recipiente de tinción para lavarlo con un tampón para eliminar cualquier rastro de solución.
Tiña el portaobjetos con una solución que contenga un sustrato para la enzima beta-galactosidasa e incuba.
El sustrato ingresa a las células, donde la beta-galactosidasa escinde el sustrato, produciendo un producto de color azul que se acumula más en las neuronas envejecidas.
Lave repetidamente la sección.
Agregue un medio de montaje antidecoloración y deje que se solidifique, asegurando la integridad de la sección teñida.
Observe el portaobjetos bajo un microscopio; el área con un producto de color azul intenso indica el envejecimiento de las neuronas dentro del organoide.
Después de crioseccionar los organoides, retire el
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