Tinción inmunohistoquímica de la proteína S-100 en secciones de biopsia por succión rectal humana

Tome secciones fijas de biopsia por succión rectal humana con antígenos proteicos expuestos y peroxidasas endógenas inactivadas.

Agregue una solución de bloqueo para evitar la unión de anticuerpos no específicos.

Reemplace la solución de bloqueo con anticuerpos primarios que se unen a la proteína de células gliales diana, S-100, un marcador de la enfermedad de Hirschsprung.

Retire los anticuerpos no unidos e incube con polímeros de peroxidasa para amplificar la señal.

Lavar para eliminar el exceso de polímero. Agregue anticuerpos secundarios que se unan a polímeros enzimáticos y anticuerpos primarios.

Elimine los anticuerpos no unidos y agregue un sustrato cromogénico.

Las peroxidasas reaccionan con el sustrato, formando un precipitado coloreado.

Enjuague para eliminar el exceso de precipitado.

Agrega un tinte para teñir los núcleos.

Lavar con una solución de etanol ácido para eliminar el exceso de tinte.

A continuación, deshidrate las secciones utilizando concentraciones crecientes de etanol seguidas de xileno.

Finalmente, monte y observe bajo un microscopio para visualizar la tinción que indica la presencia de la proteína diana.

Deseche el exceso de albúmina sérica bovina y etiqu