Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 2:29 min. • July 8th, 2025
Tomemos un ratón anestesiado implantado con una cánula guía en su cerebro.
Una sonda falsa dentro de la cánula evita la entrada de restos de tejido.
Coloque un collar alrededor del cuello del ratón.
Reemplace la sonda ficticia con una sonda de microdiálisis que contenga una membrana semipermeable especializada, que permita el flujo de moléculas con un alto peso molecular.
La sonda está conectada a las bombas a través de los puertos de entrada y salida para regular el flujo de un tampón fisiológico.
Ate el ratón dentro de una jaula con el collar, permita que se recupere e inicie el flujo.
El tampón ingresa al tejido cerebral a través de la entrada y se mezcla con el líquido intersticial, o ISF, en el espacio extracelular, que contiene proteínas involucradas en la comunicación celular.
Los componentes se difunden a través de la membrana y se recogen a través de la salida en fracciones.
El ISF recolectado, que contiene proteínas extracelulares, está listo para su análisis.
Coloque el collar alrededor del cuello del animal implantado con cánula guía anestesiada y retire la tuerca ciega y la sonda ficticia. Inserte lentamente la sonda de microdiálisis a través de la cánula guía y apriete la tuerca ciega.
Luego, coloque el ratón en una jaula conectada a un sistema de movimiento libre y ate el ratón con el collar. Después de al menos una hora, detenga secuencialmente la bomba de rodillos y la bomba de jeringa, reiniciando las bombas con la bomba de jeringa configurada a un 20% más rápido que la bomba de rodillos, y coloque el extremo libre del tubo de salida en un colector de fracción refrigerado para recolectar el ISF cerebral. Cuando se haya obtenido el volumen experimental adecuado, retire la sonda y maneje la recuperación del ratón como se acaba de demostrar.