Modelo de invasión tumoral basado en matriz mediante cocultivo de glioblastoma de microglía

Comience agregando una suspensión fría de glioblastoma y células microgliales, cada una teñida con un tinte fluorescente distinto, en una solución de matriz de polímero fría.

La condición de frío evita la polimerización prematura de la matriz.

A continuación, transfiera la mezcla a un inserto de cámara porosa dentro de una placa de cultivo.

Incubar para permitir la polimerización de la matriz, formando un gel que incrusta las células.

Agregue medios sin suero al inserto y medios de crecimiento que contengan suero al pozo de abajo, luego incube.

Los factores químicos en el suero promueven la migración celular hacia los medios ricos en suero.

Además, la microglía secreta moléculas de señalización que interactúan con las células de glioblastoma.

Esto mejora la migración de células de glioblastoma a la parte inferior del inserto poroso, similar a su migración de un tumor al tejido circundante.

Retire las celdas de la parte superior de la cámara.

Ahora, fije las células restantes con un fijador y lávelas con tampón. La fluorescencia distintiva de las células ayuda a rastrear la migración celular.

Descongele la mezcla de matriz a cuatro grados centígrados durante la noche. A continuación