Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 2:42 min. • July 8th, 2025
Comience con un ratón anestesiado y asegurado.
Retire el pelo del cuello del ratón y desinfecte el sitio quirúrgico.
Haga una incisión en el cuello y retraiga el músculo subyacente y la tráquea para exponer la arteria carótida común derecha.
La arteria carótida suministra la sangre oxigenada al cerebro.
Haga dos nudos alrededor de la arteria para restringir el flujo sanguíneo ascendente.
Sutura la incisión y transfiere el ratón a una cámara con poco oxígeno. Inserte una sonda rectal para controlar la temperatura corporal y luego ajuste la lámpara de calor para mantener la temperatura adecuada.
El bajo nivel de oxígeno en la cámara reduce los niveles de oxígeno en sangre del ratón, creando una condición de hipoxia.
Con la arteria carótida suturada, el suministro de sangre y oxígeno al cerebro se reduce aún más. Esto conduce a la isquemia, que causa daño neuronal.
Poco a poco, los componentes sanguíneos se adhieren a la pared del vaso, formando un coágulo o trombo.
Esto obstruye el flujo sanguíneo, aumentando el daño neuronal e induciendo un accidente cerebrovascular trombótico.
Coloque un ratón macho C57 negro 6 de 10 a 13 semanas de edad, de 22 a 30 gramos, en la cama quirúrgica. Después de confirmar la anestesia mediante pellizco en el dedo del pie, aplique ungüento en los ojos del animal. Estire las cuatro extremidades a lo largo del rollo del cuello y asegúrelas con cinta médica.
Luego, usando una crema depilatoria, retire el vello del cuello del animal y limpie el sitio quirúrgico. Ahora mueva el lecho quirúrgico bajo un microscopio de disección y haga una incisión cervical derecha de 0,5 centímetros en la piel a lo largo de la línea media. Con un par de pinzas finas, separe la tráquea y el músculo para exponer la arteria carótida común derecha y coloque dos suturas de seda 5-0 precortadas debajo de la arteria. Tenga cuidado de separar la arteria carótida del nervio vago.
Nudo vivo a suturas de seda liberables 5-0 precortadas en el RCCA. Luego use suturas de monofilamento de nailon 4-0 para cerrar la piel y transfiera rápidamente el ratón al sistema de hipoxia.
Coloque la mascarilla sobre la nariz y la boca del animal y una sonda rectal, de modo que se mantenga una temperatura corporal de 37,5 grados centígrados durante todo el parto de hipoxia. Ajuste las lámparas de calor.