Evaluación de la absorción de glucosa en las neuronas motoras de larvas de Drosophila con metabolismo de glucosa regulado al alza
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 4:11 min. • July 8th, 2025
Coloque las larvas de Drosophila de control y mutantes en platos separados que contengan un tampón sin glucosa.
Diseccione las larvas para extirpar los órganos internos, exponiendo el sistema nervioso central o SNC.
El SNC incluye un cordón nervioso ventral que alberga neuronas motoras. En las larvas mutantes, estas neuronas exhiben un metabolismo de la glucosa regulado al alza.
Las neuronas motoras de ambos grupos expresan sensores de glucosa intracelulares que contienen fluoróforos donantes y aceptores.
Coloque las larvas bajo un microscopio confocal. Tras la excitación, el fluoróforo donante emite fluorescencia.
Localice las neuronas motoras usando esta fluorescencia.
Reemplace el tampón con una solución suplementada con glucosa.
La glucosa ingresa a las neuronas, se une a los sensores y desencadena un cambio conformacional que acerca los dos fluoróforos.
Tras la excitación, el aceptor absorbe la energía emitida por el donante, denominada transferencia de energía de resonancia de fluorescencia o FRET, y emite fluorescencia.
La señal FRET se correlaciona con la absorción de glucosa. Una mayor intensidad de señal aceptora en las larvas mutantes en comparación con el control indica
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