Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 5:13 min. • April 28th, 2025
Tome una mosca de ojos blancos, transgénica, anestesiada y adaptada a la oscuridad.
La mosca expresa canales iónicos TRPL marcados con eGFP en los fotorreceptores del ojo.
En la oscuridad, TRPL se localiza en las membranas de los rabdómeros, las microvellosidades de los fotorreceptores.
Con aire comprimido, empuje la mosca de cabeza en la punta de una pipeta.
Recorta la punta y empuja la mosca hacia atrás.
Recórtalo de nuevo y empuja la mosca hacia adelante hasta que solo sobresalga su cabeza.
Inmovilice la punta en plastilina adherida a un portaobjetos y colóquela en una platina de microscopio de fluorescencia, con el ojo mirando radialmente hacia el objetivo del microscopio.
Agregue una gota de agua al objetivo, luego bájelo hasta que toque el ojo.
Captura imágenes de los fotorreceptores.
Mida las intensidades de fluorescencia en los rabdómeros, el cuerpo celular y el fondo.
Ilumina la mosca con luz naranja para inducir la translocación de TRPL al cuerpo celular.
Repita las mediciones de imágenes y fluorescencia.
Compare las imágenes para observar una fluorescencia rabdomeral reducida después de la iluminación, lo que indica la translocación de TRPL al cuerpo celular.
Para preparar una mos
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