Generación de un modelo esferoide tridimensional de invasión de células tumorales
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 3:18 min. • April 28th, 2025
Tome un cultivo de células tumorales cerebrales humanas.
Tratar con una enzima de disociación para interrumpir las uniones celulares, separando las células agregadas.
Lavar con un tampón para detener la actividad enzimática, luego agregar un medio de cultivo para mantener la viabilidad celular.
Introducir metilcelulosa, un agente de suspensión.
Transfiera la suspensión a una microplaca de fondo redondo e incube.
La metilcelulosa viscosa mantiene las células suspendidas, promoviendo las interacciones célula-célula para su agregación en esferoides.
Mezclar los esferoides con una matriz de colágeno que imita el entorno extracelular fisiológico.
Transfiera la suspensión a una microplaca e incube, permitiendo que la matriz forme un gel que atrape los esferoides.
Añade el medio de crecimiento encima del gel.
En la periferia esferoide, las células tumorales pierden la adhesión célula-célula y adoptan un fenotipo invasivo.
Estas células secretan proteasas para degradar la matriz, extender las protuberancias para anclarse y avanzar, invadiendo la matriz.
El modelo esferoide que exhibe invasión tumoral está listo para su análisis.
Para generar esferoides tumorales de tamaño uniforme, primero lave el cu
Vea la transcripción completa y acceda a miles de videos científicos