Medición de la tasa de consumo de oxígeno en cortes agudos de cerebro de ratón
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 4:02 min. • April 28th, 2025
Coloque punzones de corte de cerebro de ratones sanos y neurodegenerativos en pantallas de almacenamiento de muestras.
Voltee las pantallas e insértelas en una placa de tejido.
Tome un cartucho de sensor precalibrado con sondas de sensor. Cargue los compuestos (piruvato, oligomicina, FCCP y antimicina A) en los puertos de inyección.
Coloque el cartucho en la placa de tejido. Inicie la ejecución en un analizador de flujo extracelular.
Las sondas miden la tasa de consumo de oxígeno de la rebanada o (OCR).
Con la primera inyección, el piruvato ingresa a las mitocondrias, generando portadores de electrones.
Estos portadores donan electrones a los Complejos I y II de la cadena de transporte de electrones o (ETC), iniciando una reacción de transferencia de electrones que aumenta el consumo de oxígeno y OCR.
La oligomicina inhibe el Complejo V, deteniendo la síntesis de ATP y disminuyendo el OCR.
FCCP, un protonóforo, interrumpe el gradiente de protones, aumentando el consumo de oxígeno y el OCR.
La antimicina A se une al complejo III y detiene el ETC, minimizando el OCR.
Compare los perfiles de OCR.
Una disminución de la OCR en los cortes neurodegenerativos indica deterioro mitocondrial.
Succiona
Vea la transcripción completa y acceda a miles de videos científicos