Realización de una axotomía por aplastamiento del nervio facial en un modelo de ratón

Comienza con un ratón anestesiado colocado de lado, con la oreja derecha fija y el área detrás de la oreja afeitada.

Traza la vena auricular posterior y haz una pequeña incisión para acceder a los tejidos subyacentes.

Disecciona las capas de tejido mientras evitas daños a las estructuras cercanas.

Usa un hisopo de algodón para detener cualquier sangrado.

Localice el nervio facial blanco.

Identifique el canal auditivo, una estructura blanca nacarada y el vientre del músculo digástrico como puntos de referencia clave para localizar con precisión el nervio facial.

Diseccionar alrededor de estos puntos de referencia para exponer el tronco del nervio facial que contiene un haz de fibras axonales que transmiten señales a los músculos faciales.

Mantenga abierta la zona expuesta y, con fórceps, aplaste suavemente el tronco del nervio facial con una presión constante.

Repita el aplastamiento en el mismo sitio desde un ángulo perpendicular.

Este aplastamiento controlado induce tensión mecánica en las fibras del axón, lo que provoca su daño y la interrupción de la señalización neuronal.

Para determinar la ubicación de la primera incisión, trace la vena auricular posterior desde la oreja caudalmente hasta el área posterior de la protuberancia de la oreja. Luego, con unas tijeras de resorte, haga una incisión de 4 milímetros de 2 a 3 milímetros posterior a la protuberancia. Con fines didácticos, esta incisión se ampliará para exponer la anatomía subyacente.

Ahora, haga una disección roma de la grasa subcutánea y la fascia. Los vasos sanguíneos y los músculos pueden dañarse fácilmente con las tijeras. Si se produce sangrado, aplique presión con un hisopo de algodón estéril durante al menos 30 segundos. Si se ha producido una pérdida significativa de líquido, inyecte hasta 1/2 mililitro de solución salina por vía intraperitoneal con una aguja de calibre 25 o 27.

Ahora, ubique el nervio facial usando los puntos de referencia clave. El nervio accesorio espinal es superficial al nervio facial y se puede ver viajando desde la porción caudal del cráneo, para inervar el músculo trapecio. Identificar el canal auditivo cartilaginoso. Es de color blanco nacarado y se puede ver rostral al nervio facial. El nervio facial envuelve la porción caudal del canal auditivo.

Luego, identifique el vientre muscular del músculo digástrico anterior que se encuentra en la parte superior y caudal al nervio facial. Diseccionar debajo de esta estructura para exponer el nervio facial. Es una estructura blanca sólida adherida a una capa de fascia subyacente. Identificar las principales ramas del nervio facial. Trazarlos dorsalmente hasta su origen desde el foramen estilomastoideo.

Use fórceps finos para mantener abierto el sitio mientras usa la punta de las tijeras de resorte para diseccionar a lo largo del camino del nervio facial. El foramen estilomastoideo óseo se puede palpar con las pinzas. Ahora, identifique el tronco del nervio facial. Para aplastar el nervio, comprímelo con las pinzas finas durante 30 segundos con presión constante. Esto cortará todos los axones. Luego repita la compresión en un ángulo perpendicular durante otros 30 segundos. Mantenga la presión constante entre experimentos.