Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 2:34 min. • April 28th, 2025
Tome un portaobjetos con cámara con un cultivo monocapa de células endoteliales microvasculares de cerebro de rata, o RBMEC.
Las células están conectadas por proteínas de unión estrecha unidas al citoesqueleto de actina, imitando la capa endotelial de la barrera hematoencefálica.
Sustituya el medio por un medio desoxigenado sin glucosa y, a continuación, coloque el portaobjetos en una cámara de hipoxia.
La falta de disponibilidad de oxígeno y glucosa inhibe la síntesis de ATP. El ATP restante se descompone en derivados de nucleótidos.
El agotamiento de ATP dificulta las bombas de calcio, elevando el calcio intracelular que activa las enzimas oxidorreductasas.
A continuación, reponga con un medio oxigenado y, a continuación, coloque el portaobjetos en una incubadora oxigenada. Las oxidorreductasas activadas utilizan el oxígeno reintroducido para degradar los derivados de nucleótidos, generando especies reactivas de oxígeno o ROS.
ROS interrumpe las interacciones entre las proteínas de unión estrecha e induce vías de señalización que remodelan el citoesqueleto de actina en fibras de estrés, debilitando las interacciones célula-célula.
La monocapa con interacciones intercelulares interrumpid
Vea la transcripción completa y acceda a miles de videos científicos