Marcaje retrógrado de neuronas motoras de Drosophila mediante colorantes lipofílicos fluorescentes

0 visualizaciones • 4:47 min. • April 28th, 2025

Comience con un embrión de Drosophila diseccionado fijado en un portaobjetos de vidrio con cinta adhesiva alrededor.

Las neuronas motoras de la mosca están marcadas con fluorescencia para su visualización.

Con un microscopio, visualice el embrión y coloque una micropipeta lipofílica verde fluorescente llena de colorante cerca del embrión.

A continuación, cambie al modo de fluorescencia y localice la punta axonal de la neurona motora en la unión neuromuscular, donde la neurona motora se conecta con el músculo.

Cambie al modo de campo claro, entre en contacto con la punta del axón objetivo con la pipeta, libere una gota de tinte y luego incube.

Debido a su naturaleza lipofílica y a su proximidad axonal, los colorantes entran selectivamente en la membrana rica en lípidos del axón objetivo.

Con el tiempo, el tinte viaja retrógradamente, moviéndose hacia atrás a lo largo de la bicapa lipídica axonal hacia el cuerpo neuronal, etiquetando las proyecciones neuronales.

Retire la cinta del portaobjetos y coloque un cubreobjetos.

Observe el portaobjetos bajo un microscopio confocal.

La neurona diana etiquetada retrógradamente aparece en fluorescencia verde, mostrando morfología neuronal y proyec

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Colorantes fluorescentes