Obtención de imágenes microscópicas de neuronas en una sección del cerebro de un ratón mediante tinción metálica de Golgi-Cox

Comience con una sección gruesa del cerebro que se tiñó con una solución de Golgi-Cox para oscurecer selectivamente las neuronas y se contratiñó con violeta de cresilo para resaltar la región del cerebro.

Colóquelos en un portaobjetos que haya sido pretratado con un agente aclarante para mejorar la transparencia del tejido.

Coloque el portaobjetos en la platina del microscopio, aplique aceite de silicona y baje la lente del objetivo hasta que entre en contacto con el aceite.

El aceite de silicona coincide con el índice de refracción de la lente del objetivo y el portaobjetos, lo que permite obtener imágenes detalladas.

Enfoca en la muestra, luego ajusta la exposición de la cámara y el balance de blancos para obtener una calidad de imagen óptima.

Enfoca en la capa superior para establecer el límite superior, luego en la capa inferior para establecer el límite inferior.

Ajusta el espaciado entre imágenes con suficiente superposición para capturar detalles de proyecciones neuronales.

Repita las imágenes en diferentes ubicaciones para capturar áreas de interés, luego superponga estas imágenes para crear una representación tridimensional de las neuronas.

Para capturar pilas de imágenes d