Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 2:48 min. • May 29th, 2025
Comience con una configuración de microscopio de fluorescencia que contiene un diafragma inmovilizado con nervios frénicos de un ratón transgénico.
La unión neuromuscular del diafragma consta de una neurona motora, una fibra muscular y células de Schwann que contienen receptores de acetilcolina y canales de calcio.
Estas células tienen receptores de acetilcolina marcados con fluorescencia y expresan indicadores de calcio intracelular.
Un divisor de imágenes conectado a la configuración permite la visualización simultánea de ambas señales fluorescentes.
El nervio frénico se coloca en un electrodo de succión para administrar estímulos eléctricos.
Bajo el microscopio de fluorescencia, visualice los receptores de acetilcolina para identificar una unión neuromuscular.
Para establecer una fluorescencia basal máxima, agregue una solución de cloruro de potasio para despolarizar la membrana celular temporalmente. Esto desencadena la afluencia de calcio intracelular, lo que provoca un aumento en la fluorescencia de los indicadores.
Ajuste la configuración de brillo para evitar la sobresaturación de la señal de fluorescencia.
Después de la repolarización, aplique estimulaciones eléctricas para dese
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