Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 2:19 min. • May 29th, 2025
Comience con un tejido de hipocampo de ratón despejado que se vuelve ópticamente transparente mediante la eliminación de lípidos. El tejido está incrustado en una malla de hidrogel para estabilizar las biomoléculas y preservar las estructuras celulares.
El tejido contiene astrocitos que expresan proteína fluorescente roja y neuronas excitadoras que expresan proteína nuclear verde, lo que permite una visualización distinta.
Coloque el tejido en un portaobjetos y cree una cámara con pegamento caliente, dejando un pequeño espacio.
Aplique una solución de coincidencia de índice de refracción para hidratar el tejido y evitar burbujas, luego selle con un cubreobjetos.
Llene la cámara con una solución de coincidencia de índice de refracción para reducir la dispersión de luz y cerrar el espacio.
Visualice el tejido con un microscopio de dos fotones.
La luz infrarroja cercana excita las proteínas fluorescentes roja y verde en el plano focal, lo que permite obtener imágenes de alta resolución con un fotodaño mínimo. Las emisiones de fluorescencia se detectan por separado, revelando claramente la proximidad espacial entre los astrocitos y los núcleos de las neuronas excitadoras.
Primero, coloq
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