Imágenes simultáneas de la dinámica microglial y la actividad neuronal en un ratón despierto
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 3:13 min. • May 29th, 2025
Comience con un ratón transgénico asegurado en un marco estereotáctico, con una ventana craneal implantada sobre su corteza visual.
El ratón expresa EGFP en la microglía y R-CaMP, un indicador de calcio fluorescente rojo, en las neuronas de la corteza visual.
Coloque el ratón bajo un microscopio de dos fotones y ajuste la lente del objetivo para enfocar la superficie del cerebro.
Mueva el ratón con el marco estereotáctico de la lente del objetivo y coloque un dispositivo de sombreado.
Llene el dispositivo de sombreado con agua y vuelva a colocar el ratón bajo el microscopio.
Cubra la lente con una lámina negra.
El dispositivo de sombreado y la lámina bloquean la interferencia de la luz externa, lo que garantiza una imagen precisa.
Coloque un monitor LCD frente al ojo del mouse para proporcionar estimulación visual.
Configure los parámetros de imagen y comience a obtener imágenes.
La estimulación visual desencadena la excitación neuronal, lo que lleva a la entrada de calcio y un aumento de la fluorescencia de R-CaMP.
Mientras tanto, la microglía retrae sus procesos mientras interactúa con las neuronas activadas, como se observa a través de imágenes en vivo.
Para instalar el dispositivo de
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