Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 4:14 min. • May 29th, 2025
Tome una cámara de imágenes que contiene tejido del plexo mientérico colónico de ratón inmovilizado, que alberga plexos ganglionares compuestos por redes de neuronas entéricas y células gliales.
Estas células están marcadas con un indicador de calcio que emite fluorescencia al unirse al calcio.
A continuación, coloque la cámara en una platina de microscopio de fluorescencia. Perfunda la cámara con un tampón precalentado que contenga inhibidores para suprimir las contracciones musculares durante la obtención de imágenes.
Usando un microscopio, identifique las regiones ganglionares sanas que exhiben fluorescencia uniforme.
Adquiera imágenes fluorescentes para medir la actividad de referencia, proporcionando una referencia para los niveles de calcio intracelular.
Perfunde el tejido con un agonista del receptor para activar los receptores neuronales, lo que desencadena la entrada de calcio intracelular y un aumento en la intensidad de la fluorescencia.
La activación neuronal estimula indirectamente las células gliales circundantes, lo que lleva a la entrada de calcio y un posterior aumento de la fluorescencia.
Capture imágenes fluorescentes de lapso de tiempo para medir los cambios en la inte
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