Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 4:19 min. • May 29th, 2025
Coloque una rebanada de cerebro de ratón fijada químicamente en un plato con fondo de vidrio que contenga tampón y asegúrelo con una malla.
Conecte un electrodo lleno de un tinte fluorescente aniónico e hidrofílico a una fuente de voltaje.
Inserte un electrodo de tierra en el tampón para completar el circuito eléctrico.
Usando iluminación de campo claro, avance el electrodo lleno de tinte hacia la rebanada.
Cambie a imágenes de contraste de interferencia diferencial infrarroja para localizar un astrocito.
Perfore el soma de astrocitos con el electrodo para acceder al citoplasma.
Aplique una corriente eléctrica para conducir el tinte al citoplasma a través de la iontoforesis.
Cambie a microscopía confocal para monitorear el movimiento del tinte.
El tinte hidrófilo, incapaz de atravesar la membrana hidrofóbica, se difunde dentro del citoplasma para llenar el soma y las ramas.
Una vez que la celda esté llena, detenga la corriente y retire el electrodo.
Deje que la membrana de los astrocitos se vuelva a sellar.
Adquiera imágenes en varios planos Z y reconstrúyalas para visualizar la morfología de los astrocitos.
Para la prueba de inyección de tinte, coloque suavemente una rebanada de cerebro lig
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