Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 3:14 min. • May 29th, 2025
Comience con secciones cerebrales de un modelo de ratón neurodegenerativo.
Incube con una solución de bloqueo suplementada con detergente para aumentar la permeabilidad del tejido y bloquear la unión no específica. Deseche la solución.
Introducir anticuerpos primarios dirigidos a las placas de beta amiloide. Incubar con agitación para que los anticuerpos interactúen con las placas de beta amiloide, luego lavar.
Agregue anticuerpos secundarios marcados con fluoróforo rojo e incube en la oscuridad para permitir que los anticuerpos interactúen.
Lavar para eliminar los anticuerpos no unidos, seguido de un lavado con alcohol.
Agregue curcumina, que se une a los amiloides ricos en láminas beta con alta afinidad, luego lave.
A continuación, trate con concentraciones crecientes de alcohol, deshidratando las secciones del cerebro. Agregue xileno para eliminar cualquier rastro de reactivos.
Monte una sección en un portaobjetos y observe bajo un microscopio de fluorescencia.
Use un láser de longitud de onda de 590 nanómetros para excitar los fluoróforos rojos en los anticuerpos secundarios. Captura la imagen.
Cambie a un láser de longitud de onda de 480 nanómetros para excitar la curcumina, emitien
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