Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 5:40 min. • May 29th, 2025
Tome un segmento de tejido químicamente fijado y eliminado de un embrión de ratón transgénico que expresa proteína verde fluorescente (GFP) en las neuronas motoras espinales.
Monte el tejido verticalmente en una punta de pipeta modificada.
Conecte la punta a un capilar asegurado dentro del microscopio de fluorescencia de lámina de luz.
Coloque una cámara de muestra llena de tampón debajo del tejido para sumergirlo y eliminar los residuos.
Usando un software de imágenes, alinee el tejido en la trayectoria de la luz.
Comience la adquisición de imágenes.
La fuente de luz emite una fina lámina de luz láser, excitando las GFP en un solo plano del tejido para emitir fluorescencia.
Un detector colocado perpendicular a la trayectoria de la luz captura la fluorescencia emitida.
Adquirir imágenes de las neuronas motoras espinales para generar una reconstrucción 3D de la morfología de ramificación axonal.
Utilice software para mapear axones, identificando patrones de ramificación y puntos finales para evaluar el crecimiento y la conectividad de las neuronas motoras.
Configure la óptica de iluminación 5X/0.1 y la óptica de detección 5X/0.16. Ensamble el soporte de muestras y el capilar de muestras. Pr
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