Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 3:34 min. • May 29th, 2025
Comience con secciones tangenciales prefijadas de las secciones corticales del cerebro aplanadas. Lavar para eliminar los rastros de fijador.
Tiñir las secciones con una solución de diaminobenzidina o DAB y sulfato de níquel-amonio.
El DAB se difunde en las neuronas corticales y reacciona con la citocromo oxidasa en las mitocondrias, formando un precipitado oscuro. El sulfato de níquel-amonio oscurece el precipitado, mejorando el contraste.
Agregue paraformaldehído para detener la reacción de tinción, luego enjuague.
Monte las secciones en un portaobjetos y deshidrate con lavados con etanol.
Enjuague con isopropanol y xileno para despejar la sección y mejorar la transmisión de luz.
Aplique un medio de montaje y coloque un cubreobjetos sobre él.
Cuando se obtienen imágenes bajo un microscopio de campo claro, dentro de las neuronas corticales, los precipitados absorben y dispersan la luz, haciéndolos parecer oscuros.
Por el contrario, las áreas despejadas y sin teñir transmiten luz y parecen brillantes.
Este contraste resalta los módulos corticales como estructuras oscuras e irregulares sobre un fondo más claro, que representan grupos neuronales activos involucrados en el procesamiento d
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