Imágenes de lapso de tiempo de la migración radial de neuronas corticales en cortes de cerebro embrionarios de ratón transducidos

Tome un inserto de membrana que contiene cortes de cerebro organotípicos embrionarios de ratón transducidos, donde las neuronas y las células gliales radiales expresan proteínas fluorescentes, lo que permite su visualización.

Usando microscopía de fluorescencia, seleccione un corte con neuronas corticales fluorescentes que migren radialmente hacia la superficie pial del corte utilizando andamios gliales radiales intactos.

Transfiera el inserto de membrana con la rebanada seleccionada a un plato con fondo de vidrio con medios para apoyar la actividad celular durante la obtención de imágenes.

Coloque el plato en la cámara climatizada del microscopio confocal invertido para garantizar la viabilidad celular.

Ajuste los parámetros de imagen para capturar imágenes claras y minimizar el fotodaño.

A continuación, configure una pila Z en la región de destino para visualizar las estructuras celulares.

Inicie imágenes de lapso de tiempo a intervalos regulares.

Analice las imágenes para evaluar la migración radial de las neuronas corticales desde la zona subventricular hacia la placa cortical a lo largo de los andamios gliales radiales, destacando los patrones de migración neuronal.

Seleccione un cor